接种鸡卵黄液防治鸭病毒性肝炎试验

鸭病毒性肝炎（DVH）主要是3～20日龄的雏鸭发病，临床症状以发病急、死亡快，死前呈角弓反张姿态和病鸭肝脏肿胀，表面有出血斑点为病变特征的病毒性传染病。我县年出栏肉鸭2000万只以上，鸭群DVH发病率高，死亡多，经济损失很大。笔者试用鸡作为免疫蛋源，制备DVH卵黄抗体，临床试用效果良好，兹介绍于下。1试验材料与方法1.1高产蛋鸡的选择选择健康高产母鸡30只，隔离饲养，加强饲料营养和预防细菌感染，观察1周，正常时即接种疫苗。1.2DVH弱毒疫苗由江苏农科院近期生产，-15℃冷冻保存。1.3DVH肝组织上清液油剂灭活苗制备1.3.1制水相：无菌手法，取新鲜且具有DVH典型病变的肝脏，除去胆囊、称重、剪碎，按1∶3比例，用生理盐水稀释捣碎装入瓶中，加双抗，置冰箱反复冻融3次，离心，取上清，再加入肝组织，按上述方法处理，取其上清液（保留200ml冻存备用），加0.5%福尔马林（分析纯）混匀，于37℃条件下灭活24h，即可达到灭活目的，再加入4%吐温～80，高速搅匀5min，装瓶，即为水相。1.3.2制油相：取10号白油和司本DA96∶4混合加入2%硬脂酸铝，高压灭菌后即为油相。1.3.3制油苗：以油相与水相3∶1；的比例，先高速搅匀油相3min，然后逐渐加入水相，边加边混，至加完水相后再高速（10000转/min）搅拌3min，检验：静置72h或3000转/min离心不分层，判为合格。1.4卵黄抗体的制备1.4.1准备高免蛋：将DVH弱毒苗，用生理盐水稀释，每只以2倍量饮水接种疫苗，之后，于第10d和20d分别接种上述DVH油剂灭活苗2ml和4ml，注射后25d开始留蛋，留取20d的高免蛋，消毒备用。1.4.2制备孵黄抗体：将消毒过的高免蛋无菌法分离出卵黄，按1∶3比例用生理盐水稀释，匀浆过滤，加双抗冷冻保存。2安全试验和保护试验2.1安全试验给5日龄雏鸭颈背部皮下注射卵黄抗体1～2ml，隔离饲养观察10d，其精神、食欲、粪便均无明显异常。2.2保护试验随机抽出5日龄雏鸭20只，其中10只为试验组，另10只为对照组。2组均皮下注射上述肝组织上清液0.5ml，分别隔离，同条件下饲养。24h后对试验组，皮下注射卵黄抗体1ml，饲养观察14d。2.3结果试验组的雏鸭均健活。而对照组雏鸭分别于接种肝毒液后，于第4、5d，分别死亡4只和5只，余1只，精神不振，食欲减退，仅能饮少量水，至第9d衰弱而死，死亡率100%。实验组由于注射了卵黄抗体而获得了保护，相对于对照组，保护率100%。3防治效果3.1预防我县安国镇张某，养肉仔鸭每批2000只，而每批都发生过DVH，死亡10%以上，用其他药物防制、效果不够理想，使用我们提供的卵黄抗体预防，3～5日龄雏鸭皮下注射卵黄抗体1ml/只，于10d后再注射1次，照和此方法预防3批，均未发病。3.2治疗2003年4月13日上午，朱寨镇孙某饲养的1500只13日龄肉鸭发生了死前背头症状、剖检肝脏具有明显的出血斑点，胆囊肿大，肾脏充血，呈斑驳状，胰脏肿大，临床诊断DVH病，已死亡12只，即用卵黄抗体皮下注射2ml，当天死亡21只，次日早上即停止死亡。之后对王店村刘某等4户所养的6400多只雏肉鸭DVH病进行了治疗，也获得较满意的效果。4讨论4.1给鸡接种鸭DVH肝毒油剂灭活苗，强化免疫，能获得相应特异性卵黄抗体，防治鸭DVH病，具有良好的效果，也能避免应用同源蛋黄液可能带来的疫病传播。4.2对于卵黄抗体和肝组织上清液的效价，可进行中和试验等方法检测，但受条件限制，未能测定，有待进一步试验。